DNA亲子鉴定即STR分型检测一般实验对样本的要求:细胞数量≥106个,DNA含量>20ng/µl,体积大于20µl。对于精斑样本是怎样提取DNA的呢?
a) 适量精斑检材,剪碎后放到1.5 mL离心管中;
b) 加入1 mL纯水,室温保温30 min;
c) 高速振荡1 min,用牙签去除载体;
d) 10,000-15,000 r/min离心2 min;
e) 去上清仅留50 µL,用无菌吸头吹打沉淀;
f) 加入5% Chelex 100 100-200目)至200 µL,加入2 µL 10mg/mL蛋白酶K和7 µL 1 mol/L DTT,轻轻混匀;
g) 56℃保温60 min;
h) 高速振荡5-10 s,10,000-15,000 r/min离心10-20 s;
i) 沸水煮8 min;
j) 高速振荡5-10 s,10,000-15,000 r/min离心3 min;
k) 取上清液用于扩增反应;
l) 2-8℃保存或冻存剩余DNA,再次使用时重复步骤i)-k)。
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