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DNA亲子鉴定-如何从精斑中提取DNA?
来源:北京亲子鉴定中心
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    DNA亲子鉴定即STR分型检测一般实验对样本的要求:细胞数量≥106个,DNA含量>20ng/µl,体积大于20µl。对于精斑样本是怎样提取DNA的呢?

    a)   适量精斑检材,剪碎后放到1.5 mL离心管中;

    b)   加入1 mL纯水,室温保温30 min

    c)   高速振荡1 min,用牙签去除载体;

    d)   10,000-15,000 r/min离心2 min

    e)   去上清仅留50 µL,用无菌吸头吹打沉淀;

    f)   加入5% Chelex 100 100-200目)至200 µL,加入2 µL 10mg/mL蛋白酶K7 µL 1 mol/L DTT,轻轻混匀;

    g)   56℃保温60 min

    h)   高速振荡5-10 s10,000-15,000 r/min离心10-20 s

    i)   沸水煮8 min

    j)   高速振荡5-10 s10,000-15,000 r/min离心3 min

    k)   取上清液用于扩增反应;

l)   2-8℃保存或冻存剩余DNA,再次使用时重复步骤i)-k)

 

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